📚 الهندسة الوراثية والتقنيات الحيوية
المفاهيم الأساسية
الهندسة الوراثية: التحكم في DNA بإضافة جين خارجي من مخلوق حي آخر.
التقنيات الحيوية (Biotechnology): استعمال الهندسة الوراثية لإيجاد حلول لمشكلات محددة.
المخلوقات المعدلة وراثيًا (Transgenic organisms): مخلوقات تم تعديلها وراثيًا بواسطة إدخال جين من مخلوق حي آخر.
خريطة المفاهيم
```markmap
الوراثة الجزيئية
١٠-٣: DNA، RNA، والبروتين
الشفرة الوراثية (الكودون)
#### اكتشاف الشفرة
#### تركيب الشفرة
#### خصائص الكودونات
الترجمة (Translation)
#### مكان العملية
#### دور tRNA
#### دور الريبوسوم
#### نهاية الترجمة
عمليتا النسخ والترجمة
#### النسخ (في النواة)
#### الترجمة (في السيتوبلازم)
مختبر تحليل البيانات 10-1
تأثير الريفامبين على النسخ
نتائج الرسم البياني
١٠-٤: التنظيم الجيني والطفرة
الفكرة الرئيسية
- يتم تنظيم التعبير الجيني داخل الخلية
- يمكن أن تؤثر الطفرات في هذا التعبير
التنظيم الجيني في بدائيات النوى
- المنطقة الفعالة (Operon) تتحكم في نسخ الجينات
- مثال: استجابة بكتيريا E. coli للتريبتوفان واللاكتوز
التنظيم الجيني في حقيقيات النوى
- أكثر تعقيداً من بدائيات النوى
- يتطلب محفزاً واحداً لمجموعة من الجينات
#### التحكم في عملية النسخ
##### عوامل النسخ
- تضمن التوقيت والكمية الصحيحة للبروتينات
- مجموعتان رئيسيتان:
- عوامل تنظم إنزيم بلمرة RNA وتوجه ارتباطه
- بروتينات منظمة تتحكم بسرعة النسخ
- البروتينات النشطة: تطوي DNA لتقريب المحفزات وزيادة سرعة النسخ
- البروتينات المثبطة: ترتبط بمواقع على DNA لتمنع ارتباط المحفزات
##### دور تركيب DNA
- DNA ملتف حول الهستونات (جسيمات نووية)
- يوفر هذا التركيب بعض التثبيط للنسخ
- يمكن للبروتينات المنظمة وإنزيم بلمرة RNA تنشيط جينات محددة رغم الطي
#### تداخل RNA (RNA interference)
##### الآلية
- تُقطع قطع صغيرة من RNA ثنائي السلسلة في السيتوبلازم بواسطة إنزيم "المقطع"
- الناتج: جزيئات RNA المتداخلة الصغيرة (ثنائية السلسلة)
- يرتبط جزيء RNA المتداخل الصغير مع معقد بروتيني
- يقوم المعقد بتكسير سلسلة واحدة من RNA
- ترتبط السلسلة المفردة الناتجة مع المعقد البروتيني بـ mRNA محدد في السيتوبلازم
##### النتيجة
- يتم تقطيع mRNA المستهدف
- يتم منع ترجمة mRNA إلى بروتين
الطفرة
#### تعريف الطفرة
- تغير دائم في DNA الخلية
- نادر الحدوث، وللخلية آليات إصلاح
- تغير في الجين → تغير في البروتين المصنع (مثال: إنزيم غير نشيط)
#### أسباب الطفرة
##### الطفرات التلقائية
- تحدث أثناء تضاعف DNA
- يضيف إنزيم بلمرة DNA القاعدة الخطأ أحياناً
- نسبة الخطأ بعد التصحيح: 1 لكل بليون
##### العوامل المسببة للطفرات (Mutagens)
- مواد كيميائية تتلف الـ DNA أو تغير تركيب القواعد
- تؤدي إلى عدم ارتباط القواعد في أزواج أو ارتباطها بقاعدة أخرى خطأ
- بعضها له تركيب شبيه بالنيوكليوتيدات ويمكن أن يحل محلها في الـ DNA، مما يعيق التضاعف الصحيح
- ذات أهمية طبية (مثل: الإيدز والأمراض الفيروسية الأخرى)
#### أنواع الطفرات
##### الطفرات النقطية (الجينية)
- تغير كيميائي في زوج واحد من القواعد
###### الاستبدال (Substitution)
- استبدال زوج قواعد بآخر
- يؤدي إلى إنتاج بروتين غير فاعل
- أنواعه:
- الطفرات الحساسة (Missense): تغير الشفرة لحمض أميني آخر
- الطفرات غير الحساسة (Nonsense): تغير الكودون لكودون توقف (توقف مبكر للترجمة)
###### الإضافة
- إضافة نيوكليوتيد إلى تسلسل DNA
###### الحذف
- فقدان نيوكليوتيد من تسلسل DNA
- طفرات الإضافة والحذف تؤدي إلى طفرات الإزاحة (تغير ترتيب الأحماض الأمينية)
##### طفرات الكروموسومات
- حذف قطع كبيرة من الكروموسومات
#### ارتباط الطفرات بالأمراض
- طفرة في DNA المسؤول عن إنزيم هضم الفينيل ألانين
- تؤدي إلى تراكم حمض الهوموجنتيسيك (يغير لون البول)
- مرتبط بنسبة عالية من طفرات الإزاحة والطفرات الحساسة
- عدم نمو الغضروف (طفرة حذف): تؤدي إلى قزامة.
- ضمور العضلات (طفرة حساسة): خلل عضلي شديد يزداد مع تقدم السن.
- التليف الكيسي (طفرة غير حساسة): مخاط غير طبيعي كثيف في الرئتين والأمعاء.
- مرض كرون (طفرة حذف إزاحة): التهاب حاد في الجهاز الهضمي.
- مرض شاركوت – ماري – توث (طفرة إضافة إزاحة): تلف الأعصاب الطرفية.
- مرض هنتنجتون (طفرة تضاعف): مرض دماغي شديد يزداد مع تقدم السن.
- متلازمة الكروموسوم X الهش (توسع الطفرة): تكرارات متتابعة لكودونات CGG تسبب اختلالات عقلية.
#### تأثير الإشعاع على DNA
- الأشعة عالية الطاقة (مثل X وجاما): عوامل قوية مسببة للطفرات.
- تمتص إلكترونات DNA طاقة الأشعة وتهرب من ذراتها، تاركةً
جذوراً حرة.
- الجذور الحرة تتفاعل بعنف مع جزيئات أخرى، منها DNA.
- الأشعة فوق البنفسجية (UV):
- طاقتها أقل ولا تسبب تحرير الإلكترونات.
- تربط قواعد الثايمين المتجاورة معاً، متلفة تركيب DNA.
- تسبب "انحناء" جزء DNA وتمنع انفصاله.
#### طفرة الخلايا الجسدية والجنسية
##### طفرة الخلايا الجسدية
- تحدث في الخلايا غير التناسلية.
- إذا لم تُصلح، تصبح جزءاً من الترتيب الوراثي في الخلية والخلايا الجديدة الناتجة عنها.
- لا تنتقل إلى الجيل التالي.
- آثارها:
- قد تكون
طفرات متعادلة (لا تغير الكودون أو لا تستعمل في الخلية البالغة).
- قد تؤدي إلى بروتين غير طبيعي، فتموت الخلية أو تفقد وظيفتها.
- قد تؤدي إلى السرطان إذا جعلت دورة الخلية غير منضبطة.
- تبقى الآثار داخل خلايا المخلوق الحي طالما الخلايا الجسدية هي المتأثرة.
##### طفرة الخلايا الجنسية (التكاثرية)
- تحدث في الخلايا التناسلية (الجاميتات).
- تنتقل إلى أبناء المخلوق الحي، وتوجد في كل خلية من خلايا الأبناء.
- آثارها:
- قد لا تؤثر في وظيفة خلايا الأب.
- قد تؤثر في الأبناء بشكل مأساوي.
مختبر تحليل البيانات 10-2
بناء على بيانات حقيقية
فسر الرسم البياني
#### الرسم البياني: عوامل محتملة لسبب الطفرات
- المحور السيني (X): كمية المركب لكل طبق (µg)
- المحور الصادي (Y): مستعمرات تحوي طفرات راجعة
- يوضح العلاقة بين كمية المركب وعدد الطفرات الراجعة
- يظهر أربعة مركبات (A, B, C, D) بخطوط مختلفة
التفكير الناقد
- كيف نحدد إذا كان المركب عاملاً مسبباً للطفرة؟ (باستخدام اختبار أيمز)
- صف العلاقة بين كمية المركب والطفرة.
- حلل، أي المركبات يعد أقوى مسبب للطفرة؟
الهندسة الوراثية
الخلفية
- حوالي عام 1970م: اكتشاف تركيب DNA والمبدأ الأساسي لانتقال المعلومات (DNA → RNA → بروتين).
- كان الفهم محدوداً لعمل الجينات منفردة.
المفهوم والتطبيق
- التحكم في DNA بإضافة جين خارجي من مخلوق حي آخر.
- مثال تطبيقي: جين بروتين الإضاءة الخضراء من قنديل البحر.
#### استخدام بروتين الإضاءة الخضراء
- علامة مرئية: المخلوقات المعدلة وراثياً تضيء بلون أخضر تحت ضوء بنفسجي.
- مثال: يرقات البعوض في الشكل 18-10.
- الاستخدامات:
- دراسة التعبير عن جين محدد.
- دراسة عمليات خلوية.
- دراسة تطور مرض معين.
- اختيار صفات ذات فائدة للبشر.
الأدوات والعمليات
- تستعمل أدوات فاصلة (كما في الجدول 4-10).
- العمليات الأساسية في التجارب:
- القطع.
- عزل إنزيمات القطع.
- تحديد التسلسل.
التقنيات الحيوية
- استعمال الهندسة الوراثية لإيجاد حلول لمشكلات محددة.
- جعلت استخلاص جينات من مخلوق حي ممكنة.
المخلوقات المعدلة وراثيًا
- مخلوقات تم تعديلها وراثيًا بواسطة إدخال جين من مخلوق حي آخر.
- تستعمل في الأبحاث والنواحي الطبية والزراعية.
الحيوانات المعدلة وراثيًا
- معظمها يُنتج في المختبرات من أجل الأبحاث الحيوية.
- أمثلة شائعة في المختبرات: الفئران، ذباب الفاكهة، الدودة الأسطوانية.
- أهداف إنتاجها:
- دراسة الأمراض وتطوير طرائق لمعالجتها.
- تحسين المصادر الغذائية وتحسين معيشة البشر.
- إنتاج بروتينات مفيدة (مثل: مضاد ثرومبين III من الماعز).
- إنتاج حيوانات مقاومة للأمراض (ديك رومي ودجاج).
- إنتاج أسماك تنمو سريعًا.
- قد تصبح مصدرًا لزراعة الأعضاء في المستقبل.
علماء الوراثة
- يبحثون في الجينات والوراثة والتنوع في المخلوقات الحية.
- يستخدمون آليات تتحكم في جزء DNA.
- بعضهم أطباء يشخصون ويعالجون الأمراض الوراثية.
أدوات الهندسة الوراثية (الجدول 4-10)
#### إنزيمات القطع (مثال EcoRI)
- الوظيفة: تقطع سلاسل DNA إلى قطع.
- التطبيق: إنتاج قطع DNA بنهايات عريضة يمكنها أن ترتبط بقطع DNA أخرى.
#### الفصل الكهربائي الهلامي
- الوظيفة: يفصل قطع DNA بحسب الحجم.
- التطبيق: يستعمل لدراسة قطع DNA بحسب أحجامها.
#### نسخ الجين
- الوظيفة: ينتج كميات كبيرة من جزيئات DNA هجينة متطابقة.
- التطبيق: إنتاج كميات كبيرة من DNA المعاد تركيبه لكي تستعمل في المخلوقات المعدلة وراثيًا.
#### تسلسل القواعد النيتروجينية (DNA)
- الوظيفة: تعرف تسلسل القواعد في جزء DNA الهجين، لدراسته بشكل مفصل.
- التطبيق: يستعمل لتعرف الأخطاء في تسلسل القواعد، وتحديد وظيفة جين معين، المقارنة بين جينات ذات تسلسلات متشابهة من مخلوقات حية مختلفة.
#### تفاعل البوليمر المتسلسل (PCR)
- الوظيفة: إنتاج نسخ من مناطق محددة من DNA الذي يجري تحديد ترتيب قواعده.
- التطبيق: يستعمل لنسخ DNA من أجل أي بحث علمي مثل التحليل الجنائي، والاختبارات الطبية.
```
نقاط مهمة
- جعلت التقنيات الحيوية عملية استخلاص جينات من مخلوق حي ممكنة.
- تستعمل الحيوانات والنباتات والبكتيريا المعدلة وراثيًا في الأبحاث والنواحي الطبية والزراعية.
- يستعمل علماء الوراثة آليات تتحكم في جزء DNA للبحث في الجينات والوراثة.
- تُنتج معظم الحيوانات المعدلة وراثيًا في المختبرات من أجل الأبحاث الحيوية.
- من التطبيقات العملية: إنتاج مضاد ثرومبين III من الماعز المعدل وراثيًا لمنع تخثر الدم أثناء العمليات الجراحية.